第五节　细胞固定剂对细胞荧光染色的干扰

细胞荧光染色技术中，使细胞固定的固定剂对荧光染色也有显著的影响。如DNA测定时使用的荧光染料，有PI、EB、AO等，人们发现某些细胞固定剂对这些荧光染料有明显的影响，如使用戊二醛、甲醛固定的细胞比不固定细胞的荧光强度要弱50%左右，其主要原因是由于醛基分子与细胞内含有氨基的物质结合，干扰了插入性荧光染料与核酸分子的结合，造成荧光发射强度减弱。醇类固定剂虽然也有轻微的荧光猝灭作用，但却是固定剂中对荧光强度影响最小的一种固定剂。因此，在临床流式细胞学检验的实际工作中，细胞固定剂尽量选择醇类，如采用70%的乙醇固定。再结合温度对荧光染色的影响，应使用4℃预冷的70%乙醇进行4℃环境下的低温固定。